Diagnostisk analys av influensavirus - isolering på vävnadskultur

Analysnummer

4250 och 4251.

Indikation

Misstanke om influensainfektion och/eller uppodling av virus för stamförrådshållning och karaktärisering av svenska stammar. SMI:s roll som referenslaboratorium och WHO:s nationella influensacentrum kräver att influensaisolering görs.

Provmaterial

Nasopharyngsutsug (NPH) svalgsköljningsvätska, svalgprov, bronkeoalveolar-lavage BAL, liquor eller cellkulturer från annat laboratorium.

Analysmetod

Isolering sker på den för influensavirus känsliga cellinjen MDCK (hundnjure). Vid växt av influensavirus angrips cellerna och s.k. cytopatogen effekt (CPE) uppstår, vilken kan ses i ljusmikroskop.Verifikation och typning av influensavirus sker med immunofluorescens (IF) hemagglutination (HA) och hemagglutinationsinhibition (HAI). Arbetet utförs aseptiskt för att undvika kontaminationer med bakterier och svamp. Till cellodlingsrör/flaskor med konfluerande cellmatta sättes provmaterial och inkuberas vid 33-37°C. CPE syns ofta inom 1 vecka. HA göres på rörens/ flaskornas odlingsmedium vid CPE eller misstanke på CPE.

Prestanda

Virusisolering vid optimalt tagna prover är referensmetod för influensadetektion. Influensavirus kan vara känsligt för hantering och transport, men i förhållande till andra metoder, såsom antigendetektion är isolering mest känsligt och specifikt för influensapåvisning.

Provtagning/Förvaring/Transport

Provmaterial
Nasopharyngsutsug (NPH) svalgsköljningsvätska, svalgprov, bronkeoalveolar-lavage BAL, liquor eller cellkulturer från annat laboratorium.

Provtagningsmaterial
NPH-utsug i c:a 0,5-1mL NaCl i sterilt rör. Svalgskölningsvätska (c:a 5mL NaCl) i sterilt rör. Svalgprov på pinne i sterilt rör med c:a 1mL NaCl. Liquor och BAL i mån av tillgång, dock minst 200µL.

Provtransport

  • Provmaterialet kan förvaras i rumstemperatur före och under transport, om den totala transporttiden understiger 24 timmar.
  • Kylförvaring är att föredra, och provet skall kylas om transporten överstiger 24 timmar.
  • Transport skall ske snarast möjligt.
  • Undvik om möjligt att skicka provet på fredagar eller dag före långhelg

Svar/Tolkning

Svarsrutin inklusive referensintervall
När influensavirus isolerats, verifierats och om indicerat, typats, svaras: Influensa, typ, eventuell subtyp påvisat vid odling i vävnadskultur, och typning med (använd metod). Om vidare undersökning är indicerad skickas material vidare till WHO:s referenslaboratorium i Mill Hill i England.

Referenser

1. Diagnostic Procedures for Viral, Rikettsial, and Chlamydial Infektions. 7th Edition. Edwin H. Lennette PhD, David A. Lennette PhD, Evelyne T. Lennette PhD

Kontakt

Provsvar: 08-457 26 46
Medicinskt ansvarig: 08-457 2694
Metodfrågor: 08-457 26 22, 08-457 26 33

Priser:

För aktuella priser hänvisar vi till publikationen Prislista för speciell diagnostik som finns att ladda ner på SMI:s webbplats.

Packa provet rätt:

För praktisk handledning inför transport av prov inom Sverige hänvisar vi till publikationen Packa provet rätt som finns att ladda ner på SMI:s webbplats.

Beställning av remiss:

Beställ/ladda ner SMI:s remiss

Tipsa en vän

Uppdaterad 2006-05-10 08:59

Kontakt
Avdelningen för virologi

Fakta & fördjupning

Influensa