HHV-8 – påvisning av nukleinsyra (kvantitativ PCR)
Praktisk information
Indikation
Humant herpesvirus typ 8 (HHV-8) är korrelerat till endotelcells-cancern Kaposi’s sarkom. Denna typ av tumör är den vanligaste AIDS-relaterade cancern. Man kan även finna den hos transplantationspatienter och hos äldre män från medelhavsområdet. Man har funnit HHV-8 DNA i biopsier tagna från tumörerna men även i blodkroppar och saliv. Analysen kan göras på många typer av biologiskt provmaterial om frågeställningen uppkommer.
Kontakt
Provsvar: 08-457 25 75, 08-457 26 46, 08-457 26 23
Övriga frågor: 08-457 26 21
Provhantering
Undvik om möjligt att skicka prov på fredagar eller dag före långhelg.
- Benmärg med tillsats av EDTA: Minsta volym 200 µL. Prov ska förvaras i rumstemperatur före och under transport.
- Benmärg med tillsats av heparin: Bör undvikas, heparin kan inhibera i analysen.
- Biopsi: Förvaras i ett rör med steril 0,9 % NaCl i en volym som precis täcker provet. Prov bör förvaras i kyl i max ett dygn före transport annars bör det frysas och förbli fruset under transporten. Ofrusna kan transporteras i rumstemperatur.
- Blod (helblod med tillsats av EDTA): Minsta volym 200 µL. Prov ska förvaras i rumstemperatur före och under transport.
- Blod med tillsats av heparin: Bör undvikas, heparin kan inhibera i analysen.
- Bronkoalveolärt lavage (BAL): Minsta volym 50 µL. Förvaras i rumstemperatur, kyl eller frys före transport. Prov kan förvaras i rumstemperatur under transporten.
- Cerebrospinalvätska (CSF): Minsta volym 50 µL. Förvaras i rumstemperatur, kyl eller frys före transport. Prov kan förvaras i rumstemperatur under transporten.
- EDTA-blod (helblod med tillsats av EDTA ): Minsta volym 200 µL. Prov ska förvaras i rumstemperatur före och under transport.
- Munsköljvätska: Minsta volym 50 µL. Förvaras i rumstemperatur, kyl eller frys före transport. Prov kan förvaras i rumstemperatur under transporten.
- Obduktionsmaterial: Förvaras i ett sterilt kärl. Prov bör förvaras i kyl i max ett dygn före transport annars bör det frysas och förbli fruset under transporten. Ofrusna material kan transporteras i rumstemperatur.
- Plasma: Minsta volym 200 µL. Förvaras i rumstemperatur, kyl eller frys före och under transport.
- Saliv: Minsta volym 50 µL. Förvaras i rumstemperatur, kyl eller frys före och under transport.
- Serum: Minsta volym 200 µL. Förvaras i rumstemperatur, kyl eller frys före och under transport.
Transport
För praktisk handledning inför transport av prov inom Sverige hänvisar vi till publikationen Packa provet rätt.
Beställning av remiss:
Beställ/ladda ner SMI:s remiss
Priser:
För aktuella priser hänvisar vi till publikationen Prislista för speciell diagnostik
Information om analysen
Metod
Med PCR-teknik amplifieras specifika nukleinsyrafragment (DNA-fragment). DNA-polymeraset kan dock inhiberas av olika faktorer, exempelvis hemoglobin och proteinkomplex som kan finnas i de kliniska provmaterialen. En inhibitionskontroll analyseras därför för alla prover för att påvisa inhibition.
Svar
• <200 genom/mL: negativt
• x genom/mL: positivt
• Provmaterialet kan ej bedömas då det innehåller faktorer som inhiberar PCR-reaktionen.
Bedömning
Alla prover analyseras i duplikat. Till en tredje brunn tillsätts prov samt en liten mängd DNA. Denna brunn är provets inhibitionskontroll.
För att ett prov skall bedömas som positivt skall duplikatanalyserna av provet vara positiva samt inhibitionskontrollen gå fram till mer än 20 %.
Om endast en brunn av ett prov i duplikat blir positiv analyseras provet om.
Uppdaterad 2011-06-21 14:49