Denguefeber – antikroppsbestämning, IgG och IgM (indirekt immunofluorescens och ELISA)
Praktisk information
Indikation
Misstanke på akut denguefeber efter resa till endemiskt område.
Kontakt
Provsvar: 08-457 26 59
Medicinskt ansvarig: 08-457 24 15
Metodfrågor: 08-457 26 15, 08-457 26 99, 08-457 26 41
Förvaring
Helblod centrifugeras 10 minuter 1500 rpm alt. får stå i +2- +8 °C över natten, varefter serum avsuges och fryses om analys ej kan göras samma eller nästa dag. Serum fryses även efter avslutad analys.
Transport
För praktisk handledning inför transport av prov inom Sverige hänvisar vi till publikationen Packa provet rätt.
Beställning av remiss:
Beställ/ladda ner SMI:s remiss
Priser:
För aktuella priser hänvisar vi till publikationen Prislista för speciell diagnostik
Information om analysen
Metod
Indirekt immunofluorescens utföres på objektglas, s.k. spot-slides, med acetonfixerade virusinfekterade Vero-celler som antigen. Spädningsserier av serumprov, samt positivt och negativt kontrollserum i en spädning tillsätts brunnar på glasen. Efter tillsats av fluoresceinmärkt konjugat avläses preparatglasen i fluorescens-mikroskop.
Dengue IgM: Humant IgM binds indirekt via antihumant IgM som är bundet till fast fas. Detektion sker genom att dengueantigen bundet till specifik peroxidasmärkt monoklonal antikropp bildar komplex, som binder till humant dengue IgM i patientserum.
Om tidigare serumprov finns från samma patient, inkluderas även detta i testen (se analysprocedur).
Prestanda
Dengue IF-serologin bedöms positiv vid serokonversion eller >4-faldig titerstegring vid undersökning av parade sera. Enstaka sera med höga titrar (>640) stöder en kliniskt ställd diagnos. Emellertid måste vikten av klinik och geografisk smittort betonas på grund av de korsreaktioner som kan förekomma vid klinisk japansk encefalit och gula febern och att man vid positiv serologi bör ta med detta i bedömningen av svaret. Enbart vaccination mot andra flavivirus ger i regel endast låga titrar.
IgM-serologin bedöms positiv enligt de kriterier som finns angivna av kit-tillverkaren i enstaka prov. Observera att enbart positiv IgM ej utgör säker serologisk diagnos.
Mätintervall
Sera undersöks i spädningar 1:10 - 1:10240, eller av praktiska skäl 1:10 - 1:2560 (fyrfaldiga titersteg) för IF-serologin.
Serum testas i spädning 1+100 i IgM testen.
Svar/Tolkning
Förutom resultatet (negativ, gränsvärde eller positiv) för IgM och IgG-titrar lämnas alltid en tolkning/kommentar till resultatet. Det tas då hänsyn till klinisk frågeställning, ev. insjukningsdatum, och tidigare analysresultat m.m.
Standardsvar är:
• Aktuell/nyligen genomgången dengue(flavi)-virusinfektion.
• Inget aktuellt för dengue (flavi)-virus.
Vid oklara fall ombeds ev. avsändaren att inkomma med uppföljningsprov eller tidigare taget prov.
Uppdaterad 2008-11-10 10:10