CMV – antiviral känslighetsbestämning (ELISA)
Praktisk information
Indikation
Misstanke om nedsatt känslighet eller klinisk resistens hos Cytomegalovirus (CMV) mot de antiviraler som patienten behandlas/har behandlats med.
Kontakt
Provsvar: 08 – 457 26 46
Medicinskt ansvarig: 08 - 457 23 00
Metodfrågor: 08 – 457 26 55
Provhantering
Provet förvaras i termostat vid 37°C. Om det uppodlade isolatet inte kan analyseras omedelbart fryses det i lågtemperaturfrys och odlas igen när analysen skall ske.
Transport
För praktisk handledning inför transport av prov inom Sverige hänvisar vi till publikationen Packa provet rätt.
Beställning av remiss
Beställ/ladda ner SMI:s remiss
Priser
För aktuella priser hänvisar vi till publikationen Prislista för speciell diagnostik
Information om analysen
Metod
Humana lungfibroblaster i 96-hålsplattor infekteras med CMV från patient respektive med CMV-kontrollstammar under påverkan av olika koncentrationer av substanser (Foscavir, Cymevene, Vistide) med antiviral effekt. Plattorna inkuberas vid 37°C i 7 dagar. Cytopatogen effekt avläses i mikroskop. Efter tvättning fixeras cellerna. I en ELISA-metod, där en monoklonal antikropp riktad mot matrixproteinet pp65 binder till det virus som har infekterat cellerna, påvisas den koncentration av antivirala substanser som har inhiberande effekt.
Prestanda
Metoden mäter känslighet inom terapeutiskt relevanta områden. Dess mätvärden överensstämmer med publicerade resultat. Med "intra assay"-kalibrering enligt ovan har metoden god reproducerbarhet.
Medelvärdet ± en standardavvikelse för 14 analyser av den känsliga kontrollstammen Towne var:
- 52±17 µmol/L för Foscavir
- 2,2±1,5 µmol/L för Cymevene
Medelvärdet ± en standardavvikelse för 6 analyser av den känsliga kontrollstammen Towne var:
- 0,187 ±0,062 µmol/L för Vistide
Range vid 3 analyser av den resistenta kontrollstammen SMI 12*020118 var: - >800 µmol/L för Foscavir
- >32 µmol/L för Cymevene
- 4-29 µmol/L för Vistide
Mätintervall
- IC50 för Foscavir: <50 µmol/L till >800 µmol/L (patientvirus); <25 µmol/L till >100 µmol/L (känsligt kontrollvirus); <200 µmol/L till >800 µmol/L (resistent kontrollvirus)
- IC50 för Cymevene: <0,25 µmol/L till >32 µmol/L (patientvirus); <0,25 µmol/L till >4 µmol/L (känsligt kontrollvirus); <4 µmol/L till >32 µmol/L (resistent kontrollvirus)
- IC50 för Vistide: <0,064 µmol/L till >40 µmol/L (patientvirus); <0,0128 µmol/L till >0,32 µmol/L (känsligt kontrollvirus); <1,6 µmol/L till >40 µmol/L (resistent kontrollvirus)
Svar/Tolkning
Svarsrutin inklusive referensintervall. I svaret anges IC50-värde för Foscavir, Cymevene respektive Vistide med en kommentar.
Standardsvar är:
- Känslig (Foscavir <= 300 µmol/L; Cymevene <= 20 µmol/L; Vistide <= 2µmol/L)
- Nedsatt känslighet (Foscavir 300-600 µmol/L; Cymevene 20-32 µmol/L; Vistide 2-4 µmol/L).
- Resistent (Foscavir >600 µmol/L; Cymevene >32 µmol/L; Vistide >4 µmol/L)
Uppdaterad 2008-11-10 15:36
